Izolácia DNA

Izolácia DNA – 1
Izolácia DNA – 2
Izolácia DNA – 3
Izolácia DNA – 4
Izolácia DNA – 5
Izolácia DNA – 6
Izolácia DNA – 7
Izolácia DNA – 8
Izolácia DNA – 9
Izolácia DNA – 10
Izolácia DNA – 11
Izolácia DNA -12
Izolácia DNA -13
Izolácia DNA -14
Izolácia DNA -15
Izolácia DNA – 16

Izolácia DNA vo virológii

Izolácia DNA vo virológii – 1
Izolácia DNA vo virológii – 2
Izolácia DNA vo virológii – 3
Izolácia DNA vo virológii – 4
Izolácia DNA vo virológii – 5

Troubleshooting

Problém

Príčina

Riešenie

Fragmentácia DNA

Nadmerná homogenizácia/vortexovanie vzorky

Nevortexovať vzorky DNA, nepoužívať mechanické narušenie tkanív. Jemne homogenizovať pipetovaním

DNA kontaminovaná Dnázami

Používať rukavice pri izolácii DNA a pracovať čo najčistejšie (používať reagencie, ktoré boli otestované na prítomnosť Dnáz)

Nízky  výťažok DNA

Tkanivo obsahuje oveľa nižšie hladiny NK ako sa očakávalo

Zvýšiť množstvo tkaniva/buniek, ktoré má byť homogenizované

Neúplná lýza buniek

Úplné rozsuspendovanie buniek, predĺžiť čas potrebný na lýzu buniek

Neúplná elúcia

Väčší elučný objem a dlhšia doba elúcie môže zvýšiť výťažok

Neúplná obnova vyzrážanej DNA

Po zrážaní a centrifugácií, môžu byť časti DNA prilepené na stene mikroskúmavky. Opatrne odoberať roztoky, aby sa DNA neodsala počas pipetovania

Nedostatočná čistota DNA po spektrofotometrickom meraní

Prítomnosť kontaminantov (fenol, proteíny,…)

Opakovať precipitáciu alebo prečistenie DNA

Zrazenina vo vzorke DNA

Veľké množstvo DNA, nedošlo k rozpusteniu

Pridať viac elučného roztoku

Kontaminácia biologického pôvodu

Vyhodiť vzorku a zopakovať izoláciu

WE VIRUSES VIRUSES US